DH5α-λpir 化學感受態(tài)細胞
簡要描述：DH5α-λpir 化學感受態(tài)細胞
DH5α λpir菌株來源于DH5α，在DH5α大腸桿菌基因組中引入LAMpir，即為DH5α λpir，該菌株可以表達 PIR蛋白，使得含有R6Kg ori復制子的質?？梢栽谄渲姓椭啤?DH5α λpir菌株缺失核酸內(nèi)切酶 （endA），提高了質粒DNA的產(chǎn)量和質量；重組酶缺陷型 （recA）減少插入片段的同源重組概率，保證了插入DNA 的穩(wěn)定性。
更新時間：2022-01-18
廠商性質：生產(chǎn)廠家
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詳情介紹
| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFNC86002 |
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| 規(guī)格 | 10x100ul/50x100ul | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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| 主要用途 | 僅用于科研 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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DH5α-λpir 化學感受態(tài)細胞
產(chǎn)品規(guī)格CAT#: BFNC86002-01(10×100ul)/BFNC86002-02(50×100ul)
DH5α λpir： 100μl/支
pUC19 (control vector，10pg/μl): 10μl
保存條件(保質期)： -80℃（6個月）
基因型
F- φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) LAMpir U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1 phoA
產(chǎn)品說明
DH5α λpir菌株來源于DH5α，在DH5α大腸桿菌基因組中引入LAMpir，即為DH5α λpir，該菌株可以表達 PIR蛋白，使得含有R6Kg ori復制子的質?？梢栽谄渲姓椭啤?DH5α λpir菌株缺失核酸內(nèi)切酶 (endA)，提高了質粒DNA的產(chǎn)量和質量；重組酶缺陷型 (recA)減少插入片段的同源重組概率，保證了插入DNA 的穩(wěn)定性；lacZΔM15的存在使DH5α可用于藍、白斑篩選；但DH5α λpir菌株生長速度較慢，在平板培養(yǎng)或液體搖菌時應延長生長時間。
青旗生物生產(chǎn)的DH5α λpir感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19質粒檢測轉化效率>1×109 cfu/μg DNA。
DH5α-λpir 化學感受態(tài)細胞
操作方法
1. DH5α λpir感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產(chǎn)物）并用手bo打EP管底混勻，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇70分鐘。
4. 5000 rpm離心1分鐘收集菌體，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱至少18小時。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化。插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. DH5α λpir菌株生長緩慢，在平板上培養(yǎng)或液體搖菌時應延長菌體生長時間（37℃，18小時以上）。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應減少終用于涂板的菌量。
